Valeliigendite tootlemine tuvirakkudega, Parkinsoni tõbi

Need varased sümptomid ei vaja sageli ravimeid.. Raviks kasutatakse yumexit, neomidadanti, neuroprotektoreid, antioksüdante. Monoklonaalsete antikehade kõrge spetsiifilisus muudab need eriti hästi meditsiiniliseks kasutamiseks.

Mõni ei saa kaelakee kinnitada, teised aga teevad kaelakeed käsitsi. Patsient saab teha kõik, et Parkinsoni tõve aktiivselt mõjutada, Kuunarnuki lihaste looklaine vähemalt üks väga hea põhjus: sümptomite halvenemine on sageli palju aeglasem neil, kes suhtuvad oma seisundisse positiivselt ja aktiivselt, kui need, kes seda ei tee.

Kõigepealt on soovitatav leida arst, keda patsient usaldab ja kes teeb koostööd raviplaani väljatöötamisel. Stressi vähendamine on hädavajalik - stress halvendab kõiki Parkinsoni tõve sümptomeid. Soovitatavad on haridusklassid: joonistamine, laulmine, luule lugemine, näputöö, keeleõpe, reisimine, meeskonnatöö, seltskondlikud tegevused.

Kahjuks ei taga see isegi siis, kui ravimteraapia on piisavalt valitud, seda, et rakud enam ei sureks Parkinsoni tõve käes. Teraapia eesmärk peaks olema motoorse aktiivsuse jaoks soodsate tingimuste loomine, võttes arvesse haiguse kliinilise pildi individuaalseid omadusi.

Nagu arvukate uuringute tulemused näitavad, on professionaalne motoorse taastusravi eeltingimus haiguse progresseerumise aeglustamiseks ja selle prognoosi parandamiseks. See on suunatud värisemise, kõndimise, kehahoia, tasakaalu, lihastoonuse ja kõne korrigeerimisele.

Tantsuteraapia võimaldab teil osaliselt lahendada Parkinsoni tõvega seotud spetsiifilised probleemid: tasakaalu kaotus, halb koordinatsioon, loksumine, värisemine, kõvenemine, sotsiaalne eraldatus, depressioon ja suurenenud ärevus.

USA uuringus, milles osales 52 Parkinsoni tõbe põdevat patsienti, vähendab argentiina tantsu regulaarne harjutamine haiguse sümptomeid, parandab tasakaalu ja parandab Parkinsoni tõve korral keeruliste liigutuste sooritust. Haigusega kaasnevad psüühilised ja autonoomsed häired, isiksuse muutused.

Diagnoosi kindlakstegemiseks on vaja kliinilisi sümptomeid ja Valeliigendite tootlemine tuvirakkudega uuringu andmeid. Haiguse progresseerumise ja süvenemise aeglustamiseks peab Parkinsoni tõvega patsient võtma pidevalt ravimeid.

Haiguse algus langeb kõige sagedamini 55—aastaselt, seda tuvastatakse harva alla aastastel inimestel ja väga harva - kuni aastaselt. Viimasel juhul on tegemist erivormiga: alaealiste parkinsonismiga. Esinemissagedus on 60— juhtu elaniku kohta. Mehed haigestuvad sagedamini kui naised, suhe on umbes 3: 2.

Mis see on? Parkinsoni tõbi on üks levinumaid neurodegeneratiivseid haigusi. Parkinsoni tõve sümptomid ja nähud on väga iseloomulikud: vähenenud motoorne aktiivsus, aeglane kõndimine ja liikumine, jäsemete värisemine. Selle põhjuseks on aju teatavate struktuuride jussi nigra, punane tuum lüüasaamine, mis vastutavad dopamiini vahendaja tootmise eest. Esinemise põhjused Parkinsoni tõbi ja parkinsonism põhinevad põhjendatud nigra neuronite arvu vähenemisel ja neis - Levi kehas - sissetungide moodustumisel.

Selle arengut soodustab pärilik eelsoodumus, arenenud ja seniilne vanus, eksogeensete tegurite mõju. Akineetilise-jäiga sündroomi esinemisel võib olla oluline päriliku seisundi põhjustatud kahjustunud katehhoolamiini metabolism ajus või seda metabolismi kontrollivate ensüümsüsteemide alaväärsus. Selle haiguse perekondlik koormus tuvastatakse sageli autosomaalse domineeriva päranditüübi korral. Sarnaseid juhtumeid nimetatakse Parkinsoni tõvest.

Mitmed ekso- ja endogeensed tegurid ateroskleroos, infektsioonid, joobeseisundid, vigastused aitavad kaasa subkortikaalsete tuumade katehhoolamiini metabolismi mehhanismides tekkivate tõeliste puuduste Valeliigendite tootlemine tuvirakkudega ja haiguse esinemisele. Parkinsonismi sündroom ilmneb närvisüsteemi ägedate ja krooniliste infektsioonide puukentsefaliit ja muud tüüpi entsefaliit tagajärjel. Parkinsoni tõve ja parkinsonismi põhjused võivad olla ajuvereringe ägedad ja kroonilised häired, peaaju ateroskleroos, tserebrovaskulaarsed haigused, kasvajad, vigastused ja närvisüsteemi kasvajad.

Parkinsonism võib areneda ravimite mürgistuse tagajärjel fenotiasiini tüüpi ravimite kloorpromasiin, triftasiinmetüüldopa ja mõnede ravimite - ravimite parkinsonismi pikaajalise kasutamise korral. Parkinsonism võib areneda ägeda või kroonilise joobeseisundi korral vingugaasi ja mangaaniga. Väriseva halvatuse ja Parkinsoni sündroomi peamine patogeneetiline lüli on katehhoolamiinide dopamiini, norepinefriini vahetuse rikkumine ekstrapüramidaalses süsteemis.

Dopamiin täidab motoorsete aktide rakendamisel iseseisvat vahendajafunktsiooni. Tavaliselt Valeliigendite tootlemine tuvirakkudega dopamiini kontsentratsioon põhisõlmedes mitu korda suurem kui selle sisaldus närvisüsteemi teistes struktuurides.

Atsetüülkoliin on ergastamise vahendaja striaatumi, kahvatu palli ja musta aine vahel. Dopamiin on selle antagonist, toimides pärssivalt. Musta aine ja kahvatu palli kahjustamisel väheneb dopamiini tase caudate tuumas ja koores, rikutakse dopamiini ja norepinefriini suhet ning rikutakse ekstrapüramidaalsüsteemi funktsioone.

Tavaliselt moduleeritakse impulssi caudate tuuma, kesta, musta aine surumise ja kahvatu palli stimuleerimise Haiget beebi harja. Kui musta aine funktsioon on välja lülitatud, tekib ajukoore ja striatumi ekstrapüramidaalsetest tsoonidest seljaaju eesmiste sarvedeni impulsside blokeerimine. Samal ajal satuvad kahvatu sfääri ja musta aine patoloogilised impulsid eesmiste sarvede rakkudesse. Selle tulemusel suureneb impulsside ringlus seljaaju alfa- ja gamma-motoorsete neuronite süsteemis alfa-aktiivsuse ülekaaluga, mis viib lihaskiudude ja värisemise pallidar-nigraalse jäikuse ilmnemiseni - parkinsonismi peamiste tunnusteni.

Mis toimub? Degeneratsiooniprotsess toimub nn mustas aines - ajurakkude rühmas, mis kuulub subkortikaalsetesse moodustistesse. Nende rakkude hävitamine viib dopamiini sisalduse vähenemiseni. Dopamiin on aine, mille kaudu edastatakse teavet subkortikaalsete moodustiste vahel programmeeritud liikumise kohta. See tähendab, et kõik motoorsed toimingud on justkui ajukoores kavandatud ja teostatakse subkortikaalsete moodustiste abil. Dopamiini kontsentratsiooni vähenemine põhjustab liikumise eest vastutavate neuronite vaheliste ühenduste katkemist ja pärssiva toime suurenemist.

See tähendab, et motoprogrammi rakendamine on keeruline, aeglustub. Lisaks dopamiinile mõjutavad motoorse akti teket atsetüülkoliin, norepinefriin ja serotoniin. Need ained vahendajad mängivad samuti rolli närviimpulsside ülekandmisel neuronite vahel. Vahendajate tasakaalustamatus põhjustab vale liikumisprogrammi moodustamist ja motoorset toimingut ei rakendata vastavalt olukorrale.

Liigutused muutuvad aeglaseks, puhkeseisundis ilmnevad jäsemete värinad, lihaste toon on häiritud.

Abstraktne

Parkinsoni tõve korral neuronite hävitamise protsess ei peatu. Progresseerumine viib üha uute sümptomite ilmnemiseni, olemasolevate tugevnemiseni. Degeneratsioon haarab aju teisi struktuure, ühinevad vaimsed ja vaimsed, autonoomsed häired.

Klassifikatsioon Diagnoosi sõnastamisel võetakse arvesse valitsevat sümptomit. Selle põhjal eristatakse mitmeid vorme: Jäik-bradükineetiline variant, mida iseloomustab kõige enam lihastoonuse suurenemine ja motoorse aktiivsuse langus. Tema peamine sümptom on muidugi värisemine. Haiguse tunnuseid saab ravida. Mõnel juhul aitab kirurgiline sekkumine haigust tõhusalt võidelda. Diagnostika Haiguse terviklik diagnoosimine põhineb Valeliigendite tootlemine tuvirakkudega seisundi uurimisel, patsiendi kaebustel ja mitmete kriteeriumide kombinatsioonil.

Instrumentaalsetest uurimismeetoditest on usaldusväärne positronemissioontomograafia PETmilles radioaktiivset fluorodopa manustatakse intravenoosselt ja hinnatakse selle akumuleerumise määra aju konkreetsetes piirkondades. Selle meetodi puuduseks on selle kõrge hind ja madal levimus.

Muud laboratoorsed ja instrumentaalsed meetodid ei võimalda haiguse põhjuseid usaldusväärselt kindlaks teha ja selle ravi välja kirjutada, seetõttu kasutatakse neid muude sarnaste sümptomitega haiguste välistamiseks. Diagnoosimiseks on vaja kombineerida hüpokineesiat koos ühe või mitme sümptomiga puhkevärin sagedus Hzlihasjäikus, kehaasendite häired. Parkinsoni tõve ravi See haigus on ravimatu, kõik kaasaegsed teraapiaravimid leevendavad ainult Parkinsoni tõve sümptomeid.

Sümptomaatiline ravi on suunatud motoorsete häirete kõrvaldamisele. Kuidas ravida Parkinsoni tõbe? Haiguse varases staadiumis on näidustatud teostatav füüsiline aktiivsus, füsioteraapia harjutused. Narkootikumide ravi tuleb alustada võimalikult hilja, kuna pikaajalise pikaajalise ravimite kasutamise korral tekib patsiendil sõltuvus, annuse sunniviisiline suurendamine ja selle tagajärjel suurenenud kõrvaltoimed.

Parkinsonismi raskete kliiniliste ilmingute korral on baasravimiks praegu levodopa, tavaliselt kombinatsioonis dekarboksülaasi inhibiitoriga. Annused suurenevad aeglaselt mitme nädala jooksul, kuni saavutatakse kliiniline toime. Ravimi kõrvaltoimeteks on düstoonilised häired ja psühhoosid. Kesknärvisüsteemi sisenev Levodopa dekarboksüleeritakse dopamiiniks, mis on vajalik basaalganglionide normaalseks funktsioneerimiseks. Ravim mõjutab peamiselt akineesiat ja vähemal määral muid sümptomeid.

Levodopa ja dekarboksülaasi inhibiitori kombinatsiooni abil saate vähendada levodopa annust ja seeläbi vähendada kõrvaltoimete riski. Sümptomaatiliste Parkinsoni-vastaste ravimite arsenalis on suur koht antikolinergilistel ravimitel, mis blokeerides m- ja n-kolinergilisi retseptoreid aitavad lõdvestada vöötlihaseid ja silelihaseid, vähendavad vägivaldseid liikumisi ja bradükineesia tagajärgi.

Need on looduslikud ja sünteetilised atropiinitaolised ravimid: bellasoon romparkinnorakin, combipark. Kasutatakse ka fenotiasiini tüüpi ravimeid: dinesiin, deparkool, parsidool, diprasiin. Parkinsonismi raviks kasutatavate ravimite mitmekesisuse peamine põhjus on nende ebapiisav terapeutiline efektiivsus, kõrvaltoimete esinemine, individuaalne talumatus ja kiire harjumine. Parkinsoni tõve morfoloogilised ja biokeemilised muutused on nii keerulised ning haiguse kulg ja selle tagajärjed on nii rasked, ning neid süvendavad ka asendusravi - levodopa - mõjud, et selliste patsientide ravi peetakse meditsiiniliste oskuste tipuks ja allutatakse virtuoosidele - neuroloogidele.

Seetõttu on avatud ja töötavad spetsiaalsed parkinsonismi ravikeskused, kus diagnoosi täpsustatakse, teostatakse seiret, valitakse vajalike ravimite annused ja raviskeemid. Te ei saa ise ravimeid välja kirjutada ega võtta. Asendusravis kasutatakse levodopa, karbidopa, nakom. See stimuleerib dopamiini adamantiini, memantiini, bromokriptiini vabanemist, pärsib dopamiini Burn luud tagasi antikoliinesteraasi ravimite ja tritsükliliste antidepressantide amitriptüliin tagasihaarde, pärsib dopamiini selegiliini lagunemist, DA-neuronite neuroprotektiivsed ained kasutavad antioksüdante - kaltsetüfiliini, kanalit blokeerivad.

Varastel etappidel on tõestatud, et pramipeksooli mirapex kasutamine säilitab elukvaliteedi. See on esmajärjekorras kõrge efektiivsuse ja ohutusega Parkinsoni tõve ravi. Raviks kasutatakse yumexit, neomidadanti, neuroprotektoreid, antioksüdante. Patsiendid vajavad terapeutilisi harjutusi vastavalt individuaalsele programmile - liikuge nii palju kui võimalik ja püsige kauem aktiivsena.

Neurostimulatsioon Neurostimulatsioon on kaasaegne ravimeetod, mis on minimaalselt invasiivne neurokirurgiline operatsioon. Seda meetodit kasutatakse järgmistel juhtudel: Vaatamata õigesti valitud ravimteraapiale ei suuda patsient sümptomite olulist vähenemist saavutada.

Patsient on sotsiaalselt aktiivne ja kardab haiguse tõttu töö kaotamist. Haiguse progresseerumine põhjustab vajadust suurendada ravimite annust, samas kui ravimite kõrvaltoimed muutuvad talumatuks.

Patsient kaotab enesehooldusvõime ja muutub igapäevases tegevuses oma perest sõltuvaks. Võimaldab haiguse progresseerumise ajal stimulatsiooniseadete mitteinvasiivset kohandamist; Erinevalt palidotoomiast ja talamotoomiast on see pöörduv; Haiguse sümptomite üle tõhusa kontrolli periood pikeneb; Vähendas oluliselt parkinsonismi vastaste ravimite Valeliigendite tootlemine tuvirakkudega See võib olla kahepoolne see tähendab, et see on efektiivne keha mõlemal küljel esinevate sümptomite korral ; Lihtne kaasas kanda ja ohutu.

Meetodi põhiolemus: terapeutiline toime saavutatakse tänu stimulatsioonile keha aju struktuuride, mis vastutavad keha liikumise juhtimise eest, täpselt arvutatud väikese amplituudiga elektrivoolu abil. Selleks sisestatakse patsiendi ajusse õhukesed elektroodid, mis on ühendatud neurostimulaatoriga sarnane südamestimulaatorigaimplanteerides naha alla rindkere piirkonda rangluu alla.

Tüvirakkude töötlemine. Tüvirakkude kasutamist Parkinsoni tõvest käsitlevate esimeste testide tulemused avaldati Ravi seisneb tüvirakkude diferentseerumisest ajusse neuronite siirdamises. Teoreetiliselt peaksid need asendama surnud dopamiini eritavad rakud. See ensüüm vähendab Valeliigendite tootlemine tuvirakkudega tuuma aktiivsust.

Selle tagajärjel on sellel positiivne terapeutiline toime. Hoolimata saavutatud headest ravitulemustest, ei rakendata seda tehnikat Füsioteraapia Patsientidel võivad toonuse halvenemise ja hüpokineesia, näiteks õlavarreluu periartroosi tagajärjel tekkida liigese kontraktuurid. Patsientidel soovitatakse dieeti madala kolesteroolisisaldusega ja madala valgusisaldusega. Levodopa normaalseks imendumiseks tuleks valguprodukte võtta mitte varem kui tund pärast ravimi võtmist. Näidatud psühhoteraapia, refleksoloogia.

Motoorse aktiivsuse säilitamine stimuleerib sisemiste endogeensete neurotransmitterite tootmist. Parkinsoni tõve raviks on käimas teaduslikud uuringud: need on tüvi- ja dopamiini tootvad rakud ning vaktsiin Parkinsoni tõve vastu, kirurgiline ravi - talamotoomia, pallidotoomia, subtalaamilise tuuma või kahvatu palli sisemise segmendi kõrge sagedusega sügavstimulatsioon ja uued farmakoloogilised preparaadid.

Seetõttu on scFv-i terapeutiline geeniülekanne teostatav strateegia, mis ületab tavapärase antikeharavi mitmed piirangud. Sissejuhatus On hästi tõestatud, et kasvaja kasvu ja progressiooni jaoks on vajalik angiogenees, uute kapillaaride idanemine eelnevalt olemasolevatest veresoonetest. Seetõttu on kasvaja neoangiogeneesi protsessi blokeerimine paljulubav strateegia tuumori kasvu peatamiseks.

Ulatuslikud andmed on seotud veresoonte endoteeli kasvufaktori VEGF kui füsioloogilise ja kasvaja veresoonte moodustumise kriitilise vahendajaga.

VEGF on multifunktsionaalne valk ja mitte kõiki selle funktsioone ei saa asendada teiste angiogeensete teguritega. On tõestatud, et mitmed VEGF-i inaktiveerimise strateegiad on edukad kasvaja kasvu vähendamisel Valeliigendite tootlemine tuvirakkudega isegi inhibeerimisel. Siiski on traditsiooniliste takistuste tõttu antikeha teraapias närilistelt pärinevate antikehade immunogeensus inimestel, antikehade piisava koguse ja kvaliteedi kaubanduslikuks rakendamiseks raskusedviimasel ajal on pööratud suurt tähelepanu metoodikatele, mis võimaldavad täielikult inimese antikehade tootmist.

Esiteks on antikeha faagi tehnoloogia võimaldanud toota täielikult inimese antikehi suurtest antikehade repertuaaridest.

Teiseks, rekombinantse adenoviiruse süsteemse manustamise järgselt on antikehade tootmisel välditud heteroloogseid glükosüülimismudeleid nt näriliste glükoosüülimine hiire müeloomi rakkudes toodetud antikehadel.

Parkinsoni tõbi - Apaatia

Kolmandaks on välja töötatud uudsed antikehaformaadid näiteks üheahelised Fv scFv8 mis võimaldavad siduda spetsiifilisust, mida kodeerib üks polüpeptiidi geen. Lisaks on scFv antikeha fragmendid palju väiksemad kui täisimmunoglobuliinid ja seetõttu tungivad nad tõenäolisemalt kasvajamassi.

Hiljuti valiti meie laboris inimese antikeha faagi kuvamise raamatukogust VEGF-vastane üheahelaline antikeha scFv V See strateegia võimaldab huvipakkuvate valkude sünteesi otse peremeesorganismis ja sel viisil ületab raskused aktiivsete rekombinantsete valkude suuremahulisel tootmisel. Käesolevas dokumendis uurime viiruse geeniteraapia potentsiaali VEGF-vastase scFv V65 püsiva in vivo ekspressiooni jaoks.

Näitasime, et isegi scFv Vd kodeeriva rekombinantse adenoviiruse üksik süsteemne manustamine põhjustas olulise kasvaja kasvu inhibeerimise. Seda efekti võib parandada rekombinantse adenoviiruse mitme süstimisega. Kuna enamikul scFv-idel on veres lühike poolväärtusaeg, oleme püüdnud suurendada scFv V65 seerumi vereringe aega, väljendades seda kahes täiendavas formaadis: minikehana, mis koosneb scFv-st, mis on liidetud inimese IgG1 liigendiga ja CH3-domeeniga. IgG konstantseid piirkondi kasutatakse antikehade konstrueerimisel tavapäraste antikehadega sarnaste omadustega antikehade Valeliigendite tootlemine tuvirakkudega nt pikema ringlusega poolväärtusaeg, dimeerumise võime jne.

Üllatuslikult leiti, et erinevate scFv-vormingute efektiivsus sõltub manustamisviisist. Kuigi scFv VFc sulandvalgul oli kohaliku ekspressiooni korral kõige tugevam inhibeeriv toime, oli scFv V65 parem, kui adenoviirusvektor manustati süsteemselt.

See töö näitab, et rekombinantse adenoviiruse ühekordsel süstimisel on sarnane terapeutiline toime kui suurel hulgal puhastatud valgu süstimine. Seega võib neutraliseeriva VEGF-vastase antikeha fragmendi süstemaatilist manustamist geeniteraapia seadmesse lugeda kehtiva alternatiivina terapeutilistele protokollidele, mis põhinevad puhastatud antikeha preparaatide süstimisel, millel on potentsiaalsed eelised, mida pakub väikeste scFv derivaatide kudede tungimine.

Tulemused ScFv V65 ja selle derivaate kodeerivate adenoviiruste konstrueerimine ja iseloomustamine in vitro Eelmises aruandes oleme kirjeldanud ühe ahelaga antikeha VEGF-i vastu, mis põhjustas tuumori kandvatele loomadele päevas süstimisel olulise kasvaja kasvu aeglustumise. Tekkis kaks liitvalkude vormi. Rekombinantsete adenoviiruste genereerimiseks, mis sisaldavad neid konstrukte, samuti modifitseerimata scFv V65, sisestati scFv, minikeha ja scFv-Fc kodeerivad DNA järjestused pAdlox shuttle vektorisse joonis la, b; konstruktsiooni Valeliigendite tootlemine tuvirakkudega kohta vt Materjalid ja meetodid.

Rekombinantsed adenoviirused, mis kodeerivad kõiki neid geeniprodukte, genereeriti Cre- lox- vahendatud rekombinatsiooniga pärast CaPO 4- vahendatud erinevate transporti sisaldavate plasmiidide ja doonoriviiruse ~ 5 DNA CRE8 rakkudesse ülekannet, nagu kirjeldatud. Saadud rekombinantsed adenoviirused puhastati naastudega, amplifitseeriti HER rakkudes ja puhastati CsCl gradiendi tsentrifuugimise kahe vooruga.

Parkinsoni tõbi - sümptomid ja ravi - Hüpotensioon April

ScFv V65 ja selle derivaate kodeerivate rekombinantsete adenoviiruste konstrueerimine ja iseloomustamine. Näidatud on praimerid hinge, CH3 ja Fc fragmentide amplifitseerimiseks ja sisseviidud restriktsioonisaitideks.

Kattuvad järjestused on näidatud samas järjestuses kui vastavad järjestused. Täissuuruses pilt Et veenduda, et rekombinantsed adenoviirused on suunatud soovitud valkude ekspressioonile, nakatati Cos-7 rakud MOI 20 juures, kultiveerimiskeskkond koguti 2 päeva hiljem ja analüüsiti VEGF-vastaste antikehade olemasolu. Rakukultuuri söötme Western blot analüüs redutseerivates tingimustes joonis fig 2b näitas, et sekreteeritud valkude migratsioonimuster oli kooskõlas prognoositud molekulmassidega 28, 42 ja 52 kDa scFv V65, minikeha ja Valeliigendite tootlemine tuvirakkudega VFc liitvalgu puhul, vastavalt.

Sekreteeritud valkude immunoloogiline kaardistamine kinnitas, et nad sisaldavad scFv V65 osa joonis 2b, rajad 1—3 ja osa konstantsest IgG piirkonnast minikeha ja Fc liitvalk joonis 2b, rajad 4—6. Vähendamata tingimustes olid minikeha ja Fc sulandvalgu näivad molekulmassid ligikaudu 84 ja kDa, mis näitab, et need polüpeptiidid võisid moodustada dimeere joonis 2c. In vitro kirjeldatud scFv V65 ja selle derivaatide iseloomustus. Blotid töötati välja inimese IgG Fc antiseerumiga.

Täissuuruses pilt Need katsed näitasid, et rekombinantsed adenoviirused suunavad soovitud valkude sünteesi ja et dimeeri moodustumine IgG konstantses domeenis toimus tõhusalt. Infektsiooniprotseduur ei olnud optimaalne Valeliigendite tootlemine tuvirakkudega võimaliku ekspressioonitaseme jaoks, vaid seda kasutati ainult sekreteeritud valkude iseloomustamiseks.

ScFv V65 ja selle derivaate kodeerivate rekombinantsete adenoviiruste ekspressioon in vivo Et hinnata antikehade adenoviiruse poolt suunatud in vivo ekspressiooni, süstiti rekombinantsete adenoviiruste 8 x PFU sabaveeni kaudu alasti hiirtesse. Ekspressiooni kineetika näis olevat sarnane kõigi rekombinantsete adenoviiruste puhul joonis 3a, c, minikeha ei ole näidatudmillel oli kõrgeim ekspressioonitasemel 2 … 6 päeva pärast süstimist ja seejärel järkjärguline langus.

Ad scFv V65 — Fc ühekordne süstimine andis väga suure valgu ekspressiooni 2. VEGF-vastaste antikehade adenoviirusega suunatud in vivo ekspressioon. Kokku süstiti rekombinantsete adenoviiruste 8 x PFU sabaveeni kaudu karvututele hiirtele. HEN2, taime spetsiifiline RNA-helikaas, mis puudub teistes eukarüootsetes liinides, suunab tuuma-RNA substraatide erinevad alamhulgad eksosoomiga 20 lagunemiseks.

Täissuuruses pilt Meie uuring näitas kõrgelt ekspresseeritud, unikaalsete väikeste RNA-de olemasolu, mis saadi 5. Selline liini spetsiifiline väike RNA võib olla uudne kandidaat taimede molekulaarses süstemaatikas.

Kõigi kolme raamatukogu srRNA-de hulgas võib keskmiselt 40, 94 protsenti järjestustest liigitada 5. Väikesed RNA-d, mis kaardistati 5. Enamik rikkalikest lugemistest kaardistati 5. B 5 'konserveeritud järjestused erinevatest Piper liikidest. C kaardistatud srRNA-d 5. Erinevate Piper liikide 5'5.

Täissuuruses pilt Mustade piparite A 5'5.

Haiguse määratlus. Haiguse põhjused

Täissuuruses pilt Allkirjastage väikesed RNAd erinevatel taimede liiniosadel Allkirjastatud srRNA-d tuvastati taimede erinevates linetes, analüüsides nende suure läbilaskvusega väikeseid RNA järjestuse andmekogumeid täiendav joonis 3A — E. Lisaks sisaldasid need väikesed RNA-d konserveeritud 5 'motiivi. Seetõttu on võimalik, et lõikamine 5.

Poacea perekonnas olid omavahel tihedalt seotud taimed Oryza sativa alamperekond EhrhartoideaeHordeum vulgare PooideaeTriticum aestivum Pooideae ja Setaria italica panicoideae jagatud CACACi 5-kordse järjestusega.

Kuid igal taimeliigil oli unikaalne 5. Kuigi sarnane konsensusjärjestus identifitseeriti lähedalt seotud basaal-angerjaspõõsas, Nuphar advena, omas ta hästi määratletud 5'-järjestust CAAA. Vaatamata 5 'konsensusjärjestuses esinevale nukleotiidide variatsioonile, Amborella sp. Valeliigendite tootlemine tuvirakkudega Järjestuse mitmekesisus 5. Täissuuruses pilt Täissuuruses tabel Madalamate taimede väikesed RNA raamatukogud omasid ka rRF allkirja väikeseid RNA-sid, millel olid sarnased töötlemis- ja lõhestamisüritused, kuid väiksema arvukusega.

Me tuvastasime ainulaadsed 5.

Sama taime erinevate sRNA raamatukogude 5. Enamikus taimeliikides ei olnud 5. Peamine lõhustamine täheldati C nukleotiidis kõigis Poaceae sugukonda kuuluvates liikides, välja arvatud Panicum virgatum, kus täheldati "A" nukleotiidi Valeliigendite tootlemine tuvirakkudega lõhustumist täiendav joonis 4C. Teised monokoti tellimused, nagu Zingiberales, näitasid kõikides Musa accuminata sRNA raamatukogudes U nukleotiidil väga erinevat lõhustumismustrit.

Samuti täheldasime, et nendest ainulaadsetest 5. Peamine lõhustamine kaardistati vastavalt Triticum aestivumi ja Zea mays'e konsensusjärjestusest ülesvoolu 3. C nukleotiidile. Seevastu pteridofüütilise taime Marselia sp. Huvitav on see, et kõigis kahepoolsetes taimedes, välja arvatud Mimulus guttatus, täheldati olulist lõhustamist "A" nukleotiidis konsensusjärjestusest ülesvoolu täiendav joonis 4B.

Tuumade ditsotide, nagu Vitales ja Malvids, seas kaardistati kõige levinum lõikamine vastavalt 6. Lõhustumist 5.

Kõigis Solanales'i taimedes domineeris lõhustamine kuuendas nukleotiidis. See näitab 5'5. Tehti ettepanek, et igal AGO-l on erinevad sidumisafiinsused väikeste RNA-de suhtes, millel on erinevad 5'-terminaalsed nukleotiidid F 5'5, 8S rRF-id, mis on tuvastatud Ago mutantidest. Täissuuruses pilt Kui võrrelda 5. See viitab 5'5.