Liigeste Rcta-ravi

CdTe-QD-d sisestati kas klatriiniga kaetud vesiikulite kaudu, mis olid morfoloogiliselt äratuntavad nende valgu kihtide abil, või lipiidi parvedest moodustunud koobenoliini rakkudega. Lisaks näitasid onkolüütilise reoviiruse prekliinilised uuringud, et NK-rakud muutusid reoviiruse aktiveerimisel selektiivselt kasvajarakkude suhtes tsütotoksilisteks. Kõige arvukamad histooni modifikatsioonid on atsetüülimine, fosforüülimine, ubikvitineerimine ja metüleerimine spetsiifiliste kromatiini modifitseerivate ensüümide abil. Huvitaval kombel leidsime MeV-GFP-ga nakatunud A sarkoomirakkudes tugeva PD-L1 ekspressiooni induktsiooni, mis loob põhjenduse multimodaalseks terapeutiliseks lähenemiseks, mis ühendab viroteraapiat ja NK-rakul põhinevat teraapiat koos immuunkontrolli punkti inhibeerimisega tulevikus. Suurepärane varustus. Looduslikud tapjarakud NK tekivad sarkoomides väga paljutõotava ravistrateegiana [10, 11].

Allergia ja valu uhises

Laste sarkoomide bioloogiline ravi kombineeritud viroteraapia ja NK-rakkude ravi Liigeste Rcta-ravi Taust Laste sarkoomide puhul on väljakujunenud ravitulemuste tulemused endiselt halvad, eriti kemoterapeutiliste ühendite kõrge vastupidavuse tõttu. Võttes arvesse uudseid bioloogilisi lähenemisviise, leiti, et viroteraapia on tõhus paljude lastel esinevate sarkoomitüüpide korral. Ka NK-rakuravi tähistati paljulubavat tulevast strateegiat laste sarkoomiga patsientide jaoks. Uurisime siin kombinatoorset lähenemisviisi, kasutades onkolüütiliste leetrivaktsiini viroterapeutikume MeV koos inimese aktiveeritud NK-rakkudega või PBMC-dega.

Meetodid Selle kombinatoorse raviviisi tõhususe hindamiseks kasutati inimese sarkoomi rakuliini A ja HT Lisaks analüüsiti voolutsütomeetria abil retseptorite ekspressiooni NK-rakkudel ja vastavaid ligande A rakkudel.

Meditsiin Kasi liigesevalu

Tulemused Monoteraapia MeV-ga viis A ja HT sarkoomi tuumori rakumasside ajalisest ja annusest sõltuva vähenemiseni. Nagu näitasid reaalajas toimuvad proliferatsioonianalüüsid, viisid A ja HT sarkoomirakkude nakatumised MeV-ga, millele järgnes kooskultiveerimine aktiveeritud NK-rakkude või PBMC-dega, sarkoomirakkude hävitamise suurenemist, võrreldes vastavate monoteraapiatega. Paralleelselt tõi see kahekordne teraapia kaasa ensüümide, perforiini ja granulüsiini suurema vabanemise NK-rakkudest.

Vastupidiselt ei leitud NK-rakkudel aktiveerimise ja ontogeneesi retseptorite ekspressiooni muutumist pärast MeV-ga nakatunud A sarkoomirakkudega kooskultiveerimist. Järeldused Kokkuvõttes andis onkolüütilisi MeV ja aktiveeritud NK-rakke sisaldav kombineeritud ravistrateegia tulemuseks A ja HT rakkude parema onkolüüsi, võrreldes vastavate monoteraapiatega.

Paralleelselt täheldasime NK-rakkude aktivatsioonimarkerite suurenenud vabanemist kaaskultuurimisel MeV-ga nakatunud A inimese sarkoomirakkudega. Need tulemused toetavad kliiniliste uuringute algust, milles onkolüütiline Liigeste Rcta-ravi on kombineeritud NK-rakul põhineva immunoteraapiaga. Kuigi laste sarkoomi Liigeste Rcta-ravi patsientide üldine elulemus on paranenud tänu mitme toimeainega kemoteraapia režiimide edusammudele, ei ole eriti edu saavutatud.

Seetõttu on kiiremas korras vaja uusi raviviise. Onkolüütilised viirused OV on loodud vähirakkude valikuliseks nakatamiseks ja tapmiseks rakusisese replikatsiooni ja sellele järgneva onkolüüsi abil, säästtes samas normaalseid kudesid [1, 2, 3, 4]. Eelkliiniliste uuringute paljutõotavate tulemuste põhjal on paljud erinevad OV liigid praegu varases staadiumis ja arenenud kliinilises arengus [5, 6]. Veelgi enam, markervalku MeV-NIS kodeeriva leetrivaktsiiniviiruse MeV ühekordne suure annuse manustamine põhjustas kaugelearenenud staadiumis hulgimüeloomi põdeva patsiendi pikaajalist kasvaja remissiooni enam kui viis aastat [ 8].

Välisülevaade KIA Optima 2019

Eelmises prekliinilises uuringus näitasime, et MeV näitab ka onkolüütilist toimet laste sarkoomides [9].

Mõnel sarkoomi rakuliinil oli aga esmane resistentsus MeV-vahendatud onkolüüsi suhtes, mis näitab vajadust uute kombinatoorsete lähenemisviiside järele.

Looduslikud tapjarakud NK tekivad sarkoomides väga paljutõotava ravistrateegiana [10, 11].

Liigeste ravi Dikloberl

NK-rakkude aktsepteeritavat ülekandmist on juba katsetatud erinevates kliinilistes uuringutes Liigeste Rcta-ravi NCT, NCT ning see on osutunud Liigeste Rcta-ravi ohutuks ja potentsiaalselt efektiivseks immunoteraapiaks [12, 13].

Sihtrakkude tapmine toimub ainult siis, kui aktiveerivad signaalid kaaluvad pärssivaid. Ex vivo perifeersest verest aktiveeritud ja laiendatud NK-rakud näitasid tugevat in vitro tsütotoksilisust laste tahkete kasvajate, sealhulgas Ewingi sarkoomi, rabdomüosarkoomi ja osteosarkoomi vastu [14, 15, 16].

Lisaks saavutati Ewingi sarkoomi ksenotransplantaadiga hiiremudelis oluline kasvajavastane toime, mille tagajärjel likvideeriti osadel loomadel haigus [17]. NK-rakud moodustavad kaasasündinud immuunsuse kahesuguse funktsiooniga komponendi, mis vahendab mitte ainult tugevat kasvajarakkude kliirensit, vaid ka viirusevastast immuunsust.

Viiruse replikatsioon ja sellele järgnev otsene onkolüüs põhjustavad kaasasündinud immuunsussüsteemi komponentide, sealhulgas NK-rakkude, makrofaagide, dendriitsete rakkude ja neutrofiilide kemoattraktantide ja küpsemise aktivaatorite ekspressiooni suurenemist, luues seega põletikku soodustava keskkonna [18].

Samuti võib pidev nekroos viiruse onkolüüsi teel ja kaasasündinud immuunsuse värvatud komponendid hõlbustada de novo immuunrakkude sissevoolu varem immuunsusega kaitstud kasvaja mikrokeskkonda.

taastamine — Inglise tõlge - TechDico

Lisaks leiti hiljuti, Kuidas ravida jala liigeste valu NK-rakud muutusid onkolüütiliste reoviiruste aktiveerimisel selektiivselt tsütotoksilisteks kasvajarakkude suhtes [19].

Seevastu hiire glioblastoomi mudelis näidati, et onkolüütiline HSV viirus viib aktiveeritud NK-rakkude värbamiseni, mis lüüavad nakatunud tuumorirakud selektiivselt, viies sellega kiire viiruse kliirensi ja piirates seega osaliselt viroteraapia edukust [20]. Selles uuringus uurisime onkolüütiliste MeV ja aktiveeritud NK-rakkude kombinatoorset lähenemist inimese sarkoomirakkude ravis.

Leidsime kasvajarakkude hävimise kiirenenud kiiruse, võrreldes vastavate monoteraapiatega. Paralleelselt täheldasime NK-rakkudest suurenenud ensüümide, perforiini ja granulüsiini vabanemist kaaskultiveerimisel MeV-ga nakatunud inimese A sarkoomirakkudega. Söödet vahetati iga 2 kuni 3 päeva tagant. NKAES koristati päevadel 10—15 ja seejärel iseloomustati Liigeste Rcta-ravi. Leetrivaktsiini viiruse paljundamine ja tiitrimine Viirusevarude ettevalmistamiseks külvati 5 x Vero rakku 15 cm plaatidele TPP, Trasadingen, Šveits.

Pärast tsentrifuugimist xg, 15 minutit, 4 ° C hoiti puhastatud supernatanti temperatuuril ° C. Viiruse tiitrid määrati Vero rakkudel Kärberi ja Spearmani meetodil [22, 23]. Viirusnakkused Liigeste Rcta-ravi enne Liigeste Rcta-ravi nakatumist külvati A ja HT rakud 6- või augulistele plaatidele. Seejärel sööde visati ära ja rakke pesti üks kord PBS-ga. Liigeste Rcta-ravi seotud värvaine ekstraheeriti 10 mM Tris-alusega pH 10, 5.

Pärast minutist inkubeerimist toatemperatuuril RT mõõdeti optiline tihedus süvendilise mikrotiiterplaadilugejaga Tecan Genios Plus, Tecan Deutschland, Crailsheim, Saksamaa lainepikkusel nm võrdluslainepikkus nm. Mis tahes voolutsütomeetrilises analüüsis valiti elusad, elutähtsad rakud ja dubletid jäeti välja hajumisomaduste ja madala auto- fluorestsentsi intensiivsuse alusel pärast inkubeerimist Zombie-Aqua fikseeritava elujõulisuse komplektiga BioLegend, USA. Reaalajas raku jälgimise test A rakud 5 x rakku süvendi kohta külvati augulistele plaatidele E-Plate 96, Roche Applied Science, Mannheim, Saksamaa.

Kärjeindeksi väärtused arvutati kasutades RTCA tarkvara 1.

Abstraktne

Rakkude proliferatsiooni jälgiti minutiliste intervallidega tunnise vaatlusperioodi jooksul. Kahe ravirühma vahelise olulisuse määramiseks kasutati Liigeste Rcta-ravi paarimata t-testi. Tulemused Leetrivaktsiini viiruse onkolüütiline toime sarkoomirakkudele Kombinatoorse lähenemisviisi Liigeste Rcta-ravi onkolüütilise leetrivaktsiiniviiruse kasutamisel koos aktiveeritud NK-rakkude või PBMC-dega kasutasime inimese ekstraoosse Ewingi sarkoomi rakuliini A ja inimese fibrosarkoomi rakuliini HT, mis varem olid osutunud MeV-vahendatud onkolüüsi vastuvõtlikuks meie enesetappude geeniga relvastatud MeV MeV-SCD onkolüütiline viirus.

Mesilaste liigeste ravi tulemuste kinnitamiseks ja nakkuse käigust üksikasjalikuma ülevaate saamiseks nakatati mõlemad sarkoomi rakuliinid Liigeste Rcta-ravi leetrite Liigeste Rcta-ravi vektorit MeV-GFP kodeeriva GFP markergeeni abil MOI-dega 0, 1, 1 ja 10 ning määrati järelejäänud sarkoom rakumassid 24, 48, 72 ja 96 hpi juures SRB elujõulisuse testiga joonis 1.

Selle tulemusel võis mõlemas rakuliinis täheldada sarkoomi raku masside ajast ja MOI-st sõltuvat vähenemist, kui kasutada MOI-sid 1 ja 10, alustades 48 hpi joonis 1 a, b. Seega saab meie varasemaid andmeid, kus A ja HT rakud klassifitseeriti MeV-vahendatud onkolüüsi suhtes väga vastuvõtlikeks, siin üksikasjalikumalt Kuidas ravida puusavalu. Näidatud on neljas eksemplaris tehtud kolme sõltumatu katse keskmine ± SD.

Seetõttu uurisime järgnevalt MeV-nakkuse mõju NK-raku ligandide ekspressioonile A sarkoomirakkudele. Näidatud on üks kolmest sõltumatust eksperimendist. CD ja CD ekspresseeriti A sarkoomirakkudes väga kõrgel tasemel; vastavalt ei muutnud MeV nakkus ligandi ekspressiooni joonis 2 ef.

Mazda i-ACTIVSENSE - Rear Cross Traffic Alert (RCTA)

Programmeeritud surma ligandi 1 PD-L1 ekspressiooni indutseerimine sarkoomirakkudel MeV nakkuse korral Immuunsuse kontrollpunkti ligandi programmeeritud surma ligandi 1 PD-L1 Liigeste Rcta-ravi uurimiseks modelleeritud ja MeV-ga nakatunud A rakkudel joonis 3 kasutasime voolutsütomeetriat.

Näidatud on üks kolmest sõltumatust eksperimendist Täissuuruses pilt Aktiveerimise ja ontogeneesi retseptorite ekspressioon aktiveeritud ja laienenud NK-rakkudel NKAES pärast kooskultiveerimist MeV-ga nakatunud sarkoomirakkudega Järgmises etapis uurisime aktiveerimise ja ontogeneesi retseptorite ekspressiooni aktiveeritud ja laiendatud NK-rakkudel NKAES pärast ühiskultuuri koos nakatunud või MeV-ga nakatunud A rakkudega joonis 4.

Pärast tunnist ühiskultuuri määrati voolutsütomeetria abil vastavat retseptorit ekspresseerivate rakkude protsent joonis 4. Proovidele tehti antud retseptoreid ekspresseerivate rakkude osa voo tsütomeetriline kvantifitseerimine. Pange tähele, et CD56 retseptorit sellesse diagrammi Liigeste Rcta-ravi kaasatud, kuna enne rakkude alamhulga analüüsi suleti kõik rakud CD56 abil. Tulemused esindavad 5 erineva doonori andmeid. Pinnamarkerite uurimisel selgus 2. Lõpuks jälgiti rakkude reaalajas vohamist kuni hpi.

Triton X lisati negatiivse kontrollina, mis indutseeris kasvajarakkude maksimaalset lüüsi. Mõõdetud elektroodi impedantsi väljendatakse rakuindeksina.

Näidatud on kolme iseseisva katse, mis tehti kolmes eksemplaris, kasutades erinevaid doonoreid, üks esindaja Täissuuruses pilt Selle tulemusel ilmnesid nakatamata Liigeste Rcta-ravi sarkoomirakud tuumorirakkude ulatuslikku takistamatut vohamist joonis 5, vasakpoolsed paneelid; kontrollid.

Nimelt andis PBMC lisamine ainult nõrga tsütotoksilise efekti joonis 5 Liigeste Rcta-ravi, vasak paneel.

Podagra ja rtrit söe

Seevastu MeV-ga nakatunud A rakud näitasid nõrgemat proliferatsiooni. PBMC lisamine MeV-ga nakatunud A rakkudele põhjustas palju kõrgema tsütotoksilisuse võrreldes imiteeritud nakatunud rakkudega joonis 5a, parem paneel.

ILga stimuleeritud PBMC lisamine joonis 5 b või NK-rakkude lisamine joonis 5 c andis adresseeritud sarkoomirakkudele veelgi suurema tsütotoksilisuse, kusjuures MeV-ga nakatunud A korral oli tsütotoksiline toime jällegi märkimisväärselt tugevam. Kohre tootlemine liigestest iga katserühma vahel kiirusel hpi olid kujutatud eraldi diagrammidena joonisel 6. Analüüs viidi läbi, nagu on kirjeldatud joonisel 5.

HT sarkoomirakkude jaoks tuli selle rakuliini erinevate kasvuomaduste tõttu valida erinev režiim. Rakkude reaalajas vohamist jälgiti kuni 72 hpi.

NK-rakkude lisamine madala E: T suhtega 1: 1 põhjustas märkimisväärselt tugevama tsütotoksilise efekti MeV-ga nakatunud HT rakkudele, võrreldes nakatumata rakkudega.

Eksperimentaalrühmade vahelisi olulisusi Liigeste Rcta-ravi hpi juures on kujutatud joonisel fig 7 b. Näidatud on üks kahest sõltumatust eksperimendist, mis on tehtud neljas korduses, kasutades erinevaid doonoreid. Ükski neist molekulidest ei olnud NK-rakkude puudumisel kultiveeritud A rakkude supernatandis tuvastatav. Selle tulemusel suurenes MeV-ga nakatunud A sarkoomirakkude suurenenud tapmine, mida kultiveeriti koos NK-rakkudega, paralleelidega suurenenud NK-rakkude aktivatsioonimarkerite vabastamine.

Joonis 8 NK-rakkudest valgu vabanemise Liigeste Rcta-ravi href="http://monatupperware.ee/artroosi-ravi/4247-liigeste-ravi-koikjal.php">Liigeste ravi koikjal määramine pärast kooskultiveerimist MeV-ga nakatunud Liigeste Rcta-ravi sarkoomirakkudega.

Kontrollidena kasutati A sarkoomirakke ilma NK-rakkude lisamiseta. Näidatud on kolme erineva doonori keskmine ± SD. Arutelu Onkolüütiline immunoviroteraapia on kujunev raviviis mitmesuguste vähivormide korral. Pediaatriliste vähivormide osas on praegu uurimisel mitu OV-d [26] ja see on juba näidanud paljutõotavat kasvajavastast toimet arvukates laste prekliiniliste kasvajate mudelites [27, 28, 29, 30]. Kui näiteks herpes simplex-viirusel [31], reoviirusel [32] ja vaktsiiniaviirusel [33] põhinevate viroterapeutiliste ravimite kliinilised rakendused on osutunud ohutuks Liigeste Rcta-ravi lastel, siis pettumust valmistades ei osanud üheski pediaatrilises uuringus objektiivset vastust saada.

Histooni metüültransferaasi ammendumine pärsib kopsuvähirakkude proliferatsiooni, kutsudes esile mitteapoptootilise rakusurma Taust Kopsuvähk on vähiga seotud surma peamine põhjus kogu maailmas.

Selles olukorras on väga ahvatlev ühendada onkolüütilise viroteraapia sügavad immunostimuleerivad omadused immuunrakupõhiste teraapiate, näiteks NK-rakul põhinevate teraapiate, eriti tõhusate tuumoriidsete omadustega. Sellega saab kasvajarakud potentsiaalselt esmalt immunoloogiliselt märgistada viroterapeutikumidega, millele järgneb Liigeste Rcta-ravi ülitõhus elimineerimine NK-rakkude poolt.

NK-rakud on erinevalt T- ja B-rakkudest kaasasündinud immuunsussüsteemi komponendid ja aitavad kaasa esimesele kaitseliinile vähi ja viirusnakkuste vastu.

Nende aktiveerimise määrab aktiveerivate ja inhibeerivate retseptorite poolt edastatavate signaalide tasakaal, mistõttu suudavad NK-rakud sihtmärgi ära tunda ilma Liigeste Rcta-ravi sensibiliseerimiseta [34]. Nendest funktsioonidest lähtuvalt peetakse NK-rakke kasvajate jälgimisel ja kasvajate kontrolli Liigeste Rcta-ravi hoidmiseks võimsateks immuunsusefektoriteks. Kuid on ka tõestatud, et NK-rakkudel on vähihaigetel sageli talitlushäireid ja see võib aidata Liigeste Rcta-ravi immuunjälgimisest pääseda [38].

Selliseid immuunsuse eest põgenemise stsenaariume saab purustada ja lahustada viroteraapiast põhjustatud tuumorirakkude surmaga viiruse ja tuumori antigeeni ühise vabanemise saavutamine tugevalt põletikulises keskkonnasmis võib aidata taastada NK-rakkude õiget tuumoriidset funktsionaalsust.

Täpsemalt öeldes vabastab viroteraapiast põhjustatud tuumorirakkude surm viirusega seotud patogeenidega seotud molekulimustrid PAMP või ohuga seotud molekulaarsed mustrid DAMPmida tunnevad ära äratundmisretseptorid, näiteks teemaksu sarnased retseptorid TLR. Nende seotus indutseerib põletikuliste tsütokiinide nt IFN ja TNF-α ekspressiooni, mis Spin valutab menovazinit teiste rakkude retseptoritega, mille tulemuseks on kaasasündinud immuunrakkude, nagu NK, Liigeste Rcta-ravi ja γδ T-rakkude värbamine ja aktiveerimine [40, 41 ].

Veel üks paljutõotav terapeutiline strateegia nende immuunsuse eest põgenemise stsenaariumide vastu võitlemiseks on NK-rakkude kasvajavastaste funktsioonide taastamine, täiendades ex vivo aktiveeritud ja laiendatud NK-rakke eesmärgiga tühistada nende rike vähihaigetel [38]. Praegu on palju kliinilisi uuringuid, Liigeste Rcta-ravi uurivad NK-rakkude taastamise immunoterapeutilist toimet vähi raviks; täpsemalt on käimas kaks kliinilist uuringut, milles kasutatakse NK-rakke NCT, NCTsealhulgas ka pediaatrilised tahked kasvajad, näiteks Liigeste Rcta-ravi sarkoomid.

Oma prekliinilises uuringus uurisime mõlemat rakukultuuri strateegiat NK-rakkude tugeva tuumorivastase funktsionaalsuse taastamiseks lastel ekstraoosses Ewingi sarkoomimudelis A ja inimese fibrosarkoomi rakuliinis HT onkolüütilise Liigeste Rcta-ravi abil koos uue leetrivaktsiiniviirusega, mis ekspresseerib GFP-markerit.

Sellest tulenevalt peaksid Liigeste Rcta-ravi ja sellest tuletatud viroterapeutiliste vektorite tulevased rakendused kasvajatega lastel vastama kasvajat kandvate laste ravile seatud erinõuetele. Tõestati, et see viroterapeutiliselt saavutatud kasvajarakkude massi vähenemine sõltub kasutatavate nakkuslike viiruseosakeste hulgast st kasutatud MOI-stsamuti nakatumise ajahetkest ja vastavate infektsioonide kestusest.

NK-raku retseptorite interaktsioon nende vastavate ligandidega sihtrakkudel on nende tsütotoksilise aktiivsuse eeltingimus. Täheldatud kasvajavastase efektiivsuse üksikasjade edasiseks uurimiseks analüüsiti aktivatsiooni ja ontogeneesi retseptorite ekspressiooni NKAES-il, mida kasvatati kooskultuuris A sarkoomirakkudega.

Keemiline bioloogia Abstraktne Rakusurma iseloomustamiseks on vaja kasutada kaudseid markereid, mis on suuresti piiranud võimet jälgida rakusurma protsesse rakus. Siin tutvustame uut meetodit rakusurmamehhanismide iseloomustamiseks, kasutades kaadmiumtellandi kvantpunkte CdTe-QD. Kasutades nähtavaid CdTe-QD-sid mesenhümaalsete rakkudega nt sünoviotsüütidegavõimaldas elavvoolu pildistamine visualiseerida kaadmiumi poolt indutseeritud rakusurma, kombineerides apoptoosi ja autofagia omadusi.

See tulemus näitab, et A rakkude suhtes täheldatud suurenenud tsütotoksilist aktiivsust ei saa seletada selles uuringus analüüsitud NK-rakkude aktiveerimise ja ontogeneesi retseptorite Liigeste Rcta-ravi indutseeritud ülesreguleerimisega. Nimelt näidati erinevas prekliinilises uuringus, kus kasutati onkolüütilist vesikulaarse stomatiidi viirust VSVet interleukiin tüüp III IFN vahendab VSV kasvajavastast efektiivsust, sensibiliseerides kasvajarakke NK-rakkude äratundmisele ja aktiveerimisele [45].

Laste Sarkoomide Bioloogiline Ravi Kombineeritud Viroteraapia Ja NK-rakkude Ravi Abil

Lisaks näitasid onkolüütilise reoviiruse prekliinilised uuringud, et NK-rakud muutusid reoviiruse aktiveerimisel selektiivselt kasvajarakkude suhtes tsütotoksilisteks. Huvitaval kombel leiti, et NK-rakkude suurenenud tsütolüütiline aktiivsus on Liigeste Rcta-ravi inimese dendriitrakkude DC otsese aktiveerimise ja IFN-y produktsiooni ülesreguleerimisega [19, 46].

  • Kiirusta parema kae liigese
  • Kate maaramisel olaliigese terav valu
  • Olaliigese artroosi blokeerimine

Et täiendavalt uurida NK-rakkude osalemist tugevdatud onkolüüsis, määrati ja kvantifitseeriti valkude vabanemine inimese NK-rakkudest pärast kooskultiveerimist MeV-ga nakatunud A rakkudega. Huvitav on see, et viiruse aktiveeritud NK-rakkudest vabastati suures koguses granüüme A ja B, perforiini ja granulüsiini, mis näitab nende tugevat tsütotoksilist aktiivsust graanulite vahendatud raku apoptoosi kaudu.